体细胞杂交又称体细胞融合,指将两个原生质体不同的体细胞融合成一个体细胞的过程。融合形成的杂种细胞,兼有两个细胞的染色体。融合后的杂种细胞的异核体,多数情况下在第一次有丝分裂期即发生两个亲本核的融合,如果两个核在杂种细胞中位置较近,也可能在有丝分裂前就发生融合。如果两个核不融合,有可能发育成嵌合体。如果两核既相互辅助又相互排斥,从而导致染色体丢失,经常还会伴随着染色体重排、染色体碎片、染色体环、染色体桥等形成。融合后的两个原生质体的细胞质,可能均匀混合,细胞器也均匀分布,因此双方的叶绿体及线粒体基因都得到遗传。也有人认为在两个原生质体融合时,质体会随机丢失。融合后的细胞是否为杂种,多用染色体形态比较法和同工酶分析法来鉴定,也有用花器官的形态颜色来检测的。
体细胞杂交的原理是什么?
利用高剂量的X射线将候选染色体打断成若干片段,含有这种片段的细胞可与仓鼠细胞形成杂交克隆。在这种杂交中,人类染色体片段被插入到仓鼠染色体的中间部分,因此大部分克隆片段在进行有丝分裂时处于稳定的状态。利用类似于遗传重组原理和最大似然性的统计学方法来计算存在于DNA片段上的多态性或非多态性标记之间的断点频率,以此估计标记之间的距离,并建立人类基因组拷贝库---体细胞杂交系统。可根据不同要求构建出断裂程度不同的多套拷贝,从而得到不同分辨率的放射杂交图。总之,辐射性杂交是建立在受到X射线照射的供体细胞与非放射线处理的受体细胞融合基础上的一种体细胞遗传学方法,是利用两个标记之间被X射线打断的概率来计算标记之间距离,通过类似于减数分裂连锁制图的方法来确定标记之间的顺序。
体细胞杂交的用途是什么?
辐射性杂交技术是继荧光原位杂交后新近建立的染色体定位方法,RH作图法提供了一种联系物理图和遗传图的方法,已成为当今构建人类基因组大尺度、高密度、连续的染色体图的常用方法之一。其用途主要有:EST定位、基因克隆、基因组作图、测定距离、寻找新基因等。